养殖半滑舌鳎腹水病病原分离、鉴定及组织病理学研究

【摘要】半滑舌鳎（CynoglossussemilaevisGünther）生长速度快、个体大、肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富，具有很高的经济价值。目前，半滑舌鳎的养殖模式大多为室内工厂化养殖，养殖密度大，疾病频繁发生，给养殖业造成了严重的经济损失。近年来，天津市半滑舌鳎养殖场出现了大量半滑舌鳎死亡现象。患病的鱼一般腹部隆起，打开腹腔后发现病鱼肠胃中或腹腔内有大量无色或淡黄色液体，临床上一般称为腹水病。目前，对腹水病的病因和致病机理还不清楚，所以，缺乏有效、合理的防病措施。本研究对患腹水病的半滑舌鳎进行了病原分离鉴定,及药物敏感性分析，并对患病鱼进行组织病理学研究，旨为对该病的防治和深入研究提供参考资料。论文的主要研究结果如下：1.病原菌分离与鉴定从患腹水病的养殖半滑舌鳎腹水中分离到优势生长的细菌，经人工感染试验证实1株细菌（HST2菌株）为半滑舌鳎腹水病的病原。病原菌革兰氏染色阴性，菌体呈杆状。通过细菌的形态特征、培养特性和生理生化试验鉴定为副溶血弧菌。用细菌16SrRNA通用引物27F和1492R对病原菌16SrRNA基因进行PCR扩增，并对扩增片段进行克隆、测序，用NCBI-BLAST在GenBank中搜寻相似序列，结果与副溶血弧菌16SrRNA基因有99%以上的序列同源性。不同实验的鉴定结果一致，并确定病原菌为副溶血弧菌。药敏试验结果显示，致病菌对50种抗菌药物中的氨曲南、先锋必、富达欣等43种药物高度敏感，对林可霉素敏感，对青霉素G、氨苄青霉素、羧苄青霉素、苯唑青霉素、杆菌肽、阿洛西林6种不敏感。2.养殖半滑舌鳎腹水病的组织病理学研究选取患有腹水病的半滑舌鳎进行组织病理学的观察。观察结果显示，出现腹水症状的半滑舌鳎各个器官都出现了不同程度的病理变化。腹水病鱼的心脏心肌纤维结构松散，心肌出现大面积的断裂、崩解和坏死，坏死的组织间被大量的血红细胞、白血球、淋巴细胞等浸润；肠道的粘膜层和粘膜固有层分离，小肠绒毛杯形细胞膨胀变圆，肠绒毛不整齐、模糊不清、崩解甚至消失；肝脏细胞发生变性，细胞肿胀，部分细胞内的细胞质、细胞核等细胞器裂解、液化，形成大的囊胞；肾脏的肾小囊腔间隙增大，肾小球毛细血管扩张、充血，肾小管萎缩，甚至消失，肾小管上皮细胞发生水肿变性，排列紊乱，细胞内出现空泡，细胞核溶解消失，细胞间隙不清晰，甚至只留下肾小管的轮廓；患腹水症半滑舌鳎脾脏肿大，红髓与白髓分界不清，脾脏细胞变性，细胞核集中。脾髓窦内没有血细胞，间质小动脉管壁水肿增厚，中央动脉管壁的内皮细胞肿大，有不同程度的空泡变性，并有大量单核细胞、浆细胞出现。病理学的分析结果说明，多器官的病变使器官功能衰竭，正常的生理代谢逐渐下降并消失，这可能是腹水病病鱼发生死亡的最终原因。
【作者】胡璇；
【导师】孙敬锋；
【作者基本信息】天津农学院，水产养殖，2014，硕士
【关键词】半滑舌鳎；组织病理学；副溶血弧菌；16SrRNA基因；

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